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       維生素是人體重要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，但有些維生素在人體內(nèi)無(wú)法合成，或合成量不能滿足機(jī)體需要，要從外界攝取以滿足人體需要。維生素根據(jù)溶解度的不同，分為水溶性和脂溶性兩類(lèi)，水溶性維生素主要有維生素C、B1、B2、B3、B5、B6、B11和B12。不同水溶性維生素的結(jié)構(gòu)差異較大，化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定，分離檢測(cè)較為復(fù)雜困難。

       目前水溶性維生素的測(cè)定方法主要有分光光度法、分子熒光法和**液相色譜法等。分光光度法的樣品前處理較復(fù)雜，且干擾物多，測(cè)定結(jié)果偏高。分子熒光法的樣品前處理也復(fù)雜，定量不精確。**液相色譜法的樣品前處理簡(jiǎn)單，用量少，可一次分析多種水溶性維生素，是目前*合適的測(cè)定方法。

實(shí)驗(yàn)部分

      采用離子對(duì)試劑（四丁銨）作為流動(dòng)相，由于離子對(duì)試劑易吸附在色譜柱上不易**清除，因此建議用來(lái)分析水溶性維生素的色譜柱專用。

圖1. 9種水溶性維生素標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖（上）和等高線圖（下）

1. 維生素 B1 (硫胺素) *    2. 維生素 B6 (吡哆素) *  3. 煙酰胺  

          4. 維生素 B12 (氰鈷胺素)   5. 抗壞血酸糖苷  6. 維生素 C (抗壞血酸)  

       使用二極管陣列檢測(cè)器（簡(jiǎn)稱：DAD），除了色譜圖外，還可獲得光譜圖，兩者結(jié)合可排除僅通過(guò)色譜保留時(shí)間定性造成的假陽(yáng)性峰，能對(duì)食品和其他含有大量雜質(zhì)的樣品進(jìn)行精確有效的分析。

                                                                                                                     圖2. 維生素B6的標(biāo)準(zhǔn)曲線

      9種水溶性維生素的標(biāo)準(zhǔn)曲線(濃度范圍0.1 ~ 50 mg/L)均顯示了良好的線性， r² 均≥ 0.996。但采用流動(dòng)相進(jìn)行稀釋時(shí)，維生素C、異抗壞血酸和維生素B₁₂ 不穩(wěn)定，為獲得良好的線性，需使用新配制的溶液進(jìn)行測(cè)定。

                                                                                      圖3. 保健飲料的測(cè)定結(jié)果

                                                          圖4. 營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑的測(cè)定結(jié)果

       該方法可同時(shí)檢測(cè)多種水溶性維生素，標(biāo)準(zhǔn)曲線線性良好。借助二極管陣列檢測(cè)器，可對(duì)食品和其他含有大量雜質(zhì)的樣品進(jìn)行精確有效的分析，排除假陽(yáng)性性峰的干擾。由于維生素C和異抗壞血酸不穩(wěn)定，在樣品制備過(guò)程中或隨著時(shí)間的推移，二者容易發(fā)生分解，因此難以獲得良好的線性和重現(xiàn)性。所以，此方法適用于定量分析，在定量分析時(shí)，建議對(duì)各維生素單獨(dú)測(cè)定。